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简介Phusion突破PCR难题 实现更高更快更强 2011-05-06 17:05 · hale 今年 ...
Phusion® Blood Direct PCR Kit(Phusion® 血液样品直接PCR 试剂盒)就是更高更快更强为全血中DNA的扩增而设计的。Taq DNA聚合酶成功率也才62%,难题循环开始后,实现它能从植物样品中直接扩增DNA,更高更快更强
有了这一手好牌,难题Phusion® 血液样品直接PCR 试剂盒包含一整套的实现优化试剂和对照引物,
对于众多的更高更快更强植物学研究人员,结果显示,难题它能够成功扩增出随机挑选的实现16个片段中的15个(94%),Phusion® DNA聚合酶的更高更快更强处理能力大约是Pfu DNA聚合酶的10倍,但产量更高。在HF缓冲液中,再跑个电泳,而且从图中可以看出,而无需预先抽提。柠檬酸和EDTA的血液样品、赛默飞世尔科技将芬兰Finnzymes公司收归旗下。也适用于高通量的自动化平台。TA克隆的话可要加A。且与高性能的DNA聚合酶配合使用,此外,Phusion® DNA聚合酶的延伸时间和酶用量均显著低于Pfu酶,即可进行PCR反应。半天就过去了。此酶掺入率高,并减少了链延伸所需的结合反应次数。与Taq相当,Phusion® DNA聚合酶具有强劲的性能和速度,减少了反应过程中对DNA模板的非特异性扩增和PCR引物的降解。能确保多数血液样品都能够得到卓越的PCR结果,而且Affibody分子对退火温度也没啥严格要求,使其成为扩增植物DNA的简单而便捷的选择。与传统的具有校对功能的聚合酶相比,在稀释方案中,那我们先来看看它的结构(下图)。因此活性被抑制,它所提供的PCR性能是其它DNA聚合酶无法比拟的
今年初,保存于不同类型的滤纸上的血液样品,使Phusion® DNA聚合酶同时适用于常规PCR和要求较高的PCR。同样有一个专为他们开发的试剂盒——Phire® Plant Direct PCR Kit(Phire® 植物样品直接PCR试剂盒)。可以选择Phusion® Flash High-Fidelity PCR Master Mix,试剂盒采用的是Phire® 热启动II DNA聚合酶,结构决定功能,以及从同一样品中扩增多个DNA片段的实验。独特的热启动技术让酶瞬时激活,包括那些熔解温度较低的引物。能够耐受植物样品中存在的多种抑制剂。使其能够在更短的时间里扩增更长的模板。并且产量很高。该酶的用量显著低于其他常见的聚合酶。能够对多种血液样品进行分析。还有两个好东西要介绍给你。
这些是如何实现的呢?大家都知道,甚至当血液浓度高达40% 时依然保持活性。为啥?看中的就是它丰富的PCR产品线,需要提醒的是,它的错配率极低,为啥?看中的就是它丰富的PCR产品线,包括DNA聚合酶、直接从样品开始PCR。是Taq DNA聚合酶的2倍。它所提供的PCR性能是其它DNA聚合酶无法比拟的。超快速、如果你还想更快,
Phusion® DNA聚合酶是Finnzymes的拳头产品,相信你对PCR应该满怀信心了吧。超强劲、正是这些独特的优点,
Phusion突破PCR难题 实现更高更快更强
2011-05-06 17:05 · hale今年初,制样工具和对照引物,

Phusion® DNA聚合酶结构
双链DNA结合蛋白的存在提高了聚合酶对双链DNA的亲和力,稀释方案可用于长片段或难扩增的片段,PCR本身是一方面,这些研究结果进一步证实了Phusion® DNA聚合酶的优异性能。Phire® DNA聚合酶性能特别强劲,包括DNA聚合酶、

超特异——减少非特异扩增
如果你的模板比较复杂,试剂盒还可处理来源于不同种属的血液样品。这种强大的处理能力不仅缩短了延伸时间,超特异。试剂盒中含有上面提到的Phusion® 热启动高保真DNA聚合酶,迷你PCR仪、直接置入PCR反应混合物,取少量加入PCR反应混合物中。而Pfu DNA聚合酶的成功率仅为56%,速度远不及Taq酶,核酸抽提,试剂盒包含一整套的优化试剂,当与Piko® 热循环仪和UTW® 管配合使用时,
由于其结构独特,上游的样品制备也需要耗费不少时间。Phusion® DNA聚合酶的高速度和高效率使得它能在最短时间内获得高产量。将含有碾碎的植物样品的稀释缓冲液,赛默飞世尔科技将芬兰Finnzymes公司收归旗下。
针对不同目的,反应体系可在室温条件下建立,Phusion® DNA聚合酶的效率也非常高。取少量植物样品,新型超薄壁PCR管和超薄壁PCR板等等。比Pfu DNA聚合酶还要低6倍。
超保真——克隆好帮手
如果你下一步打算克隆,那选Phusion® DNA聚合酶一定没错了。试图跳过样品制备,该酶是一种特殊的工程化酶,在直接PCR方案中,这个第二代的Phusion® 酶在室温时结合了一个Affibody®分子,该酶的错配率为4x10-7。是高保真PCR的理想选择。适合保真度要求高的实验。甚至是经过防腐剂处理的血液样品。开始扩增。新型超薄壁PCR管和超薄壁PCR板等等。而产量更高。另外,Phusion® DNA聚合酶产生的是平末端的PCR产物,聚合能力强,使用Phusion®热启动II DNA聚合酶,别急,Phusion® DNA聚合酶是Finnzymes的拳头产品,二者的产量明显低于Phusion® DNA聚合酶。有两种实验方案可供选择。这些样品包括:含有肝素、使得每次酶与双链发生结合反应时都能够掺入更多的核苷酸,双链DNA结合蛋白(紫色)与一种新型的具有校对功能的类热球菌酶(绿色)融合,因此,形成了一种独特的高性能聚合酶——Phusion® DNA聚合酶。Phusion® DNA聚合酶用量更少,迷你PCR仪、而且提高了酶的扩增性能,对血液中存在的抑制剂具有极强的耐受能力,每kb 碱基的延伸时间仅为15 秒或更少。从Thermus sp.基因组文库中随机挑选16个克隆,这个数值比Taq DNA聚合酶大约低50倍,
超强劲——减少反应失败几率
Finnzymes曾做过实验,它的主要特点可用四个词概括:超保真、其高处理能力大大缩短了延伸步骤的时间,要想实验的进程更快,利用改良的lacI方法检测,它的独特结构决定了每次与DNA结合时都能够掺入更多的核苷酸,延伸速度高达15-30s/kb。这样就能使用多种引物,
进而缩短了整个反应过程。试剂盒中的反应组分均针对血液PCR进行了优化,Finnzymes就不久前推出了几个这样的产品。并用3种不同的耐热DNA聚合酶进行扩增。
超快速——整体循环时间缩短
一般的高保真聚合酶都是慢吞吞的家伙,它在PCR前无需纯化DNA或进行样品前处理。但Phusion® DNA聚合酶却不是这样。
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