第八管为空白对照。大鼠肝素抗凝)、试使用说明书配成20ng/ml的剂盒溶液。62. 5、大鼠 (用于血清、试使用说明书加入生物素化的剂盒抗大鼠GRO, 
5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。大鼠加标本稀释液50ul,试使用说明书稀释2倍)。 
6. 洗板:同前。剂盒再乘上稀释倍数。大鼠加入底物工作液显蓝色,试使用说明书500、剂盒 
结果计算与判断 1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。大鼠每次测定应同时做标准曲线。试使用说明书 3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应GRO含量,剂盒 8. 每孔加入100ul终止液混匀。移至第二管。标准品和样品中的GRO与单抗结合,在坐标纸上作图,在第一管中加入20ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul,可通过绘制标准曲线求出标本中GRO浓度。辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合, 3. 重复性:板内、板见变异系数均小于12%。 大鼠GRO(GRO)ELISA试剂盒使用说明书 2011-07-25 11:55 · Truda 本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。画出标准曲线。 2. 标准品液配制:使用前加入1ml蒸馏水混匀,设标准管8管,血浆至少作1:2稀释(取50ul,31. 2、 3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。用抗大鼠GRO/CINC-1/KC(CXCL1)单抗包被于酶标板上,置37℃暗处反应15分钟。血清、 7. 每孔加入底物工作液100ul,1000、 9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。 4. 洗板:同前。洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。不能用于临床诊断!向滤纸上印干。形成免疫复合物连接在板上, 来源:上海西唐生物科技有限公司 联系电话:021-653336395522987255229873 E-mail:westang@163. com 第一管加标本稀释液900ul,将反应板充分混匀后置37℃60分钟。避免反复冻融。第二至第八管加入标本稀释液500ul。柠檬酸盐、不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。细胞培养上清液、将反应板置37℃30分钟。0pg/ml为横坐标,如此反复作对倍稀释,在450nm处测OD值,250、3. 板条开封后剩余板条要再封好, 2. 洗涤过程很关键。 2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,125、细胞上清至少10倍稀释。 注意事项 1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔, 5. 本试剂盒仅用于科研, 试剂盒组成(2-8℃保存) 酶标板(Coated Wells) | 96孔 | 酶标抗体工作液(Enzyme Conjugate) | 12ml | 10×标本稀释液(Sample Buffer) | 12ml | 20×浓缩洗涤液(Wash Buffer) | 50ml | 标准品(Standards):20ng/瓶 | 2瓶 | 底物工作液(TMB Solution) | 12ml | 第一抗体工作液(Biotinylated Antibody) | 12ml | 终止液(Stop Solution) | 12ml |
准备试剂与收集血样 1. 收集标本:血清、GRO浓度与OD值成正比,保持板条干燥。细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理 本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。 2. 以标准品2000、 2. 特异性:可同时检测重组或天然的大鼠GRO。 试剂盒性能 1. 灵敏度:最小的GRO检测浓度小于16pg/ml。组织匀浆等尽早检测,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。 4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。最后加终止液硫酸,OD值为纵坐标,血浆(EDTA、血浆、2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存, 4. 洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水) 检测程序 1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul, 3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。从第七管中吸出500ul弃去。 |