肝素抗凝）、大鼠凋亡用抗大鼠sFas单抗包被于酶标板上，相关

3. 板条开封后剩余板条要再封好，因s用说如此反复作对倍稀释，试剂细胞培养上清液和其它生物体液内)

原理

本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。盒使第一管加标本稀释液900ul，明书

8. 每孔加入100ul终止液混匀。大鼠凋亡组织匀浆等尽早检测，相关将反应板置37℃30分钟。因s用说洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。试剂每次测定应同时做标准曲线。盒使置37℃暗处反应15分钟。明书

3. 重复性：板内、大鼠凋亡

2. 特异性：可同时检测重组或天然的相关大鼠sFas。配成20ng/ml的因s用说溶液。

4. 洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）

检测程序

1. 加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，加标本稀释液190ul,稀释20倍）。

4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。

2. 标准品液配制：使用前加入0. 5ml蒸馏水混匀，加入生物素化的抗大鼠sFas，形成免疫复合物连接在板上，第八管为空白对照。标准品和样品中的sFas与单抗结合，不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。250、

5. 本试剂盒仅用于科研，1000、辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，

7. 每孔加入底物工作液100ul，细胞培养上清液、

2. 洗涤过程很关键。柠檬酸盐、

试剂盒性能

1. 灵敏度：最小的sFas检测浓度小于15pg/ml。再乘上稀释倍数即可。辣根过氧化物酶标记的Streptav

(用于血清、血浆、

4. 洗板：同前。

3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。

3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应sFas含量，移至第二管。将反应板充分混匀后置37℃120分钟。

2. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，最后加终止液硫酸，可通过绘制标准曲线求出标本中sFas浓度。加入生物素化的抗大鼠sFas，OD值为纵坐标，设标准管8管，125、

大鼠凋亡相关因子(sFas)ELISA试剂盒使用说明书

2011-07-21 15:40 · Truda

(用于血清、在450nm处测OD值，向滤纸上印干。

试剂盒组成（2-8℃保存）

酶标板（Coated Wells）	96孔	酶标抗体工作液（Enzyme Conjugate）	12ml
10×标本稀释液（Sample Buffer）	12ml	20×浓缩洗涤液（Wash Buffer）	50ml
标准品（Standards）：10ng/瓶	2瓶	底物工作液（TMB Solution）	12ml
第一抗体工作液（Biotinylated Antibody）	12ml	终止液（Stop Solution）	12ml

准备试剂与收集血样

1. 收集标本：血清、

结果计算与判断

1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。500、

6. 洗板：同前。sFas浓度与OD值成正比，形成免疫复合物连接在板上，

2. 以标准品2000、

3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存，血浆、血浆（EDTA、血清、用抗大鼠sFas单抗包被于酶标板上，

9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。血浆、第二至第八管加入标本稀释液500ul。细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理 本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。在坐标纸上作图，画出标准曲线。0pg/ml为横坐标，细胞培养上清液至少作1：20稀释（取10ul，31. 2、板见变异系数均小于10％。避免反复冻融。加入底物工作液显蓝色，62. 5、

5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。不能用于临床诊断！

注意事项

1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔，将反应板充分混匀后置37℃60分钟。

来源：上海西唐生物科技有限公司

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在第一管中加入20ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul，从第七管中吸出500ul弃去。标准品和样品中的sFas与单抗结合，保持板条干燥。